Catalog#   MY110814

用途

此免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的氯霉素，从而对氯霉素样品起到特异性纯化和富集的作用。样品过柱后的洗脱液既可结合ELISA测试盒或胶体金试纸条进行检测，也可联合液相色谱进行精确定量。亲和色谱柱的使用可以改善信噪比，提高检测方法的准确度。

氯霉素

氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种广谱抗生素。医学临床和兽医曾用来治疗人及动物的多种感染性疾病。但氯霉素有严重的毒副作用，已被临床医学和动物生产上禁止使用。但仍存在屡禁不止的情况，食品中氯霉素的残留严重危害人体健康。

富集原理

亲和柱富集的原理是抗原抗体的特异性反应。样品经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过氯霉素免疫亲和柱，样品中的氯霉素与偶联在琼脂糖珠上的抗体结合，洗涤掉杂质后，根据后续检测需要选用洗脱液洗脱，收集的洗脱液可以用于仪器分析，或用于免疫学检测方法检测。

产品包装组成

1 氯霉素免疫亲和色谱柱                 10支

2 10ml注射器                          1支

3 说明书                                1份

5 洗脱液A(供仪器分析用）              10 mL

6 洗脱液B（供ELSIA/胶体金检测用）    10 mL

7  10×PBS                                        50 mL

8  10×PBST                           5 mL

9  饱和Tris-base溶液                            5 mL

注意事项

1 亲和柱在不使用时，需放置在于2～8℃保存，并确保在有效期之前使用。

2 柱子的填料应保持湿润，在保存、清洗、上样、洗脱的过程中不能出现填料干燥的情况。

3在操作中，每次需使亲和柱内上一步的液体全部滴净方能进入下一步操作，填料里不应有气泡

4 实验完后需对所用材料、容器、设备做适当处理。

样品处理

组织样品：将样品捣碎，取5.0 g（精确到1mg）于50 mL离心管中并加入20 mL乙酸乙酯，充分混匀后放入离心机5000 r/min离心10 min，取10 mL上清液于45℃下氮气吹干，残留物用10 mL的10%甲醇水溶解后,于4000 r/min离心5 min，并用定性滤纸过滤。收集滤液，用饱和tris-bsae调节PH=7.0±0.5，待净化。

操作程序

1 自冰箱取出免疫亲和柱，在室温（22～25℃）平衡10 min，将上方塞和下方塞子取出。上方接上已经去掉活塞的注射器。

2 清洗1：将亲和柱固定好，往注射器内依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脱液（A或B）、1 mL PBST、大约5mL PBS；每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速为1滴/2s，滴净后再加入下一个清洗液；最后流出的PBS的 PH应为7±0.5，若尚未达此PH值，适当增加PBS量来清洗。

3上样：准确量取5.0 mL处理后的样品液于注射器，控制流速为1滴/3～5 s，弃去流出液。

4 清洗2： 待样品滴净后，依次加入2 mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。

7 去掉注射器，根据后续检测需要，加入0.2 mL洗脱液A或B，洗脱液自然滴下，用2 mL的离心管接收洗脱液，接洗脱液时，流出第一滴洗脱液不要。

8 将收集到的洗脱液转入仪器分析或采用ELISA/胶体金检测。（用作ELISA/胶体金的收集液用饱和Tris-base调节PH=7.0±0.5）