Catalog #      MY110810

用途

免疫亲和色谱柱可选择性吸附样品液中的盐酸克伦特罗，从而对盐酸克伦特罗样品起到特异性纯化和富集的作用，样品过柱后的洗脱液可联合液相色谱进行精确定量，也可以结合ELISA测试盒和胶体金试纸条进行检测。亲和色谱柱使用可以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。

盐酸克伦特罗

盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂，可以提高瘦肉率，减少脂肪沉积和促进动物生长，被养殖户或养殖企业作为养殖促进剂非法使用。人食用了饲喂克伦特罗作为添加剂的动物所产生的畜产品后，残留的克伦特罗可导致人体肌肉震颤、心悸、神经过敏、头痛、目眩、恶心、呕吐、发烧、战栗等症状，对消费者的健康造成极大危害。因此世界许多国家现已明令禁止在饲料中添加克伦特罗来增加动物的瘦肉率，畜产品中禁止克伦特罗含量超标。

富集原理

亲和柱富集的原理是抗原抗体反应。样品经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过盐酸克伦特罗免疫亲和柱，样品中的盐酸克伦特罗与偶联在琼脂糖珠上的抗体结合，洗涤掉杂质后，根据检测需要选用洗脱液洗脱，收集的洗脱液可以用于仪器分析，或是免疫学检测方法检测。

产品包装组成

1 盐酸克伦特罗免疫亲和色谱柱               10支

2 10ml注射器                               1支

3 说明书                                   1份

5 洗脱液A(供仪器分析用）                 10 mL

6 洗脱液B（供ELSIA/胶体金检测用）        10 mL

7 10×PBS 50 mL

8  10×PBST 5 mL

9 饱和Tris-base溶液 5 mL

注意事项

1 亲和柱在不使用时，需放置在于2～8℃保存，并确保在有效期之前使用。

2 柱子的填料应保持湿润，在保存、清洗、上样、洗脱的过程中不能出现填料干燥的情况。

3在操作中，每次需使亲和柱内上一步的液体全部滴净方能进入下一步操作，填料里不应有气泡

4 实验完后需对所用材料、容器、设备做适当处理。

样品处理

1 尿液

用干燥、洁净的离心管或适当容器采集大约10 mL尿液。尿液样品放置或离心后取10 mL上清上柱；如果不立即检测，尿样在2-8℃冷藏可保存24 h，要注意避免因变质而造成的失效或污染。出现阳性结果时应按法定程序分瓶封装样品用于确证法检测。

2 血清

用干燥、洁净的离心管采集大约10 mL血液，静置2 h以上，以4000转/分钟以上转速离心10 min，取10 mL上清上柱。

3 组织

取组织（可以为精肉、肝脏、肺脏和肾脏）20克剪碎或匀浆，置于离心管中，在90℃下水浴15 min（肉熟透为准）后取出，静置冷却到室温，并用定性滤纸过滤，用饱和tris-bsae调节PH=7.0±0.5，取10 mL上清上柱。

操作程序

1 自冰箱取出免疫亲和柱，在室温（22～25℃）平衡10 min，将上方塞和下方塞子取出。上方接上已经去掉活塞的注射器。

2 清洗1：将亲和柱固定好，往注射器内依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脱液（A或B）、1 mL PBST、大约5mL PBS；每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速为1滴/2s，滴净后再加入下一个清洗液；最后流出的PBS的 PH应为7±0.5，若尚未达此PH值，适当增加PBS量来清洗。

3上样：准确量取10.0 mL处理后的样品液于注射器，控制流速为1滴/3～5 s，弃去流出液。

4 清洗2： 待样品滴净后，依次加入2mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。

7 去掉注射器，根据后续检测需要，加入0.2 mL洗脱液A或B，洗脱液自然滴下，用2 mL的离心管接收洗脱液，接洗脱液时，流出第一滴洗脱液不要。

8 将收集到的洗脱液转入仪器分析或采用ELISA/胶体金检测。（用作ELISA/胶体金的收集液用饱和Tris-base调节PH=7.0±0.5）