Catalog #     MY110813

用途

此免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的赭曲霉毒素A，从而对赭曲霉毒素A样品起到特异性纯化和富集的作用。样品过柱后的洗脱液既可结合ELISA测试盒或胶体金试纸条进行检测，也可联合液相色谱进行精确定量。亲和色谱柱的使用可以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。

赭曲霉毒素 A

赭曲霉毒素 A( Ochratox in A, OTA) 是由曲霉属和青霉属的某些菌种产生的有毒代谢产物, 是一种具有强肾脏毒和肝脏毒的真菌毒素，并有致畸、致突变和致癌作用。OTA广泛存在于各种食物中，可污染粮食谷物、蔬果、调味料、咖啡、啤酒、葡萄酒及干果等多种农作物和食品，严重危害人体健康。

富集原理

亲和柱富集的原理是抗原抗体反应。样品经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和柱，样品中的赭曲霉毒素A与偶联在琼脂糖珠上的抗体结合，洗涤掉杂质后，根据检测需要选用洗脱液洗脱，收集的洗脱液可以用于仪器分析，或是免疫学检测方法检测。

产品包装组成

1 赭曲霉毒素A免疫亲和色谱柱             10支

2 10ml注射器                             1支

3 说明书                                   1份

5 洗脱液A(供仪器分析用）                 10 mL

6 洗脱液B（供ELSIA/胶体金检测用）       10 mL

7 10×PBS                                               50 mL

8  10×PBST                               5 ml

9  饱和Tris-base溶液                                  5 mL

注意事项

1 亲和柱在不使用时，需放置在于2～8℃保存，并确保在有效期之前使用。

2  柱子的填料应保持湿润，在保存、清洗、上样、洗脱的过程中不能出现填料干燥的情况。

3在操作中，每次需使亲和柱内上一步的液体全部滴净方能进入下一步操作，填料里不应有气泡

4 标准品或样品中都可能含有毒素污染，在实验中应当自始至终穿戴橡胶手套、实验服。

5 实验完后需对所用材料、容器、设备做适当处理。

样品处理

称取试样50g（精确到1mg）于均质器的搅拌杯中，加入5.0g氯化钠和100.0ml的提取液（乙腈：水=60:40）。将搅拌杯装于均质器上，于22000r/min高速搅拌提取3min。提取液经槽纹折叠滤纸过滤于干净的烧杯中。准确移取10.0ml滤液于50ml容量瓶中，加磷酸缓冲液稀释至刻度，混合均匀，经玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液，用饱和tris-bsae调节PH=7.0±0.5，待净化。

操作程序

1 自冰箱取出免疫亲和柱，在室温（22～25℃）平衡10 min，将上方塞和下方塞子取出。上方接上已经去掉活塞的注射器。

2 清洗1：将亲和柱固定好，往注射器内依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脱液（A或B）、1 mL PBST、大约5mL PBS；每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速为1滴/2s，滴净后再加入下一个清洗液；最后流出的PBS的 PH应为7±0.5，若尚未达此PH值，适当增加PBS量来清洗。

3上样：准确量取5.0 mL处理后的样品液于注射器，控制流速为1滴/3～5 s，弃去流出液。

4 清洗2： 待样品滴净后，依次加入2 mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。

7 去掉注射器，根据后续检测需要，加入0.2 mL洗脱液A或B，洗脱液自然滴下，用2 mL的离心管接收洗脱液，接洗脱液时，流出第一滴洗脱液不要。

8 将收集到的洗脱液转入仪器分析或采用ELISA/胶体金检测。（用作ELISA/胶体金的收集液用饱和Tris-base调节PH=7.0±0.5）