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赭曲霉毒素A免疫亲和纯化富集柱
产品编号: MY110813
  • 10支/套
    ¥1500.00
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详细介绍


Catalog #     MY110813

用途

此免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的赭曲霉毒素A,从而对赭曲霉毒素A样品起到特异性纯化和富集的作用。样品过柱后的洗脱液既可结合ELISA测试盒或胶体金试纸条进行检测,也可联合液相色谱进行精确定量。亲和色谱柱的使用可以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。

赭曲霉毒素 A

赭曲霉毒素 A( Ochratox in A, OTA) 是由曲霉属和青霉属的某些菌种产生的有毒代谢产物, 是一种具有强肾脏毒和肝脏毒的真菌毒素,并有致畸、致突变和致癌作用。OTA广泛存在于各种食物中,可污染粮食谷物、蔬果、调味料、咖啡、啤酒、葡萄酒及干果等多种农作物和食品,严重危害人体健康。

富集原理

亲和柱富集的原理是抗原抗体反应。样品经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和柱,样品中的赭曲霉毒素A与偶联在琼脂糖珠上的抗体结合,洗涤掉杂质后,根据检测需要选用洗脱液洗脱,收集的洗脱液可以用于仪器分析,或是免疫学检测方法检测。

产品包装组成

1 赭曲霉毒素A免疫亲和色谱柱             10支

2 10ml注射器                             1支

3 说明书                                   1份

5 洗脱液A(供仪器分析用)                 10 mL

6 洗脱液B(供ELSIA/胶体金检测用)       10 mL

7 10×PBS                                               50 mL

8  10×PBST                               5 ml

9  饱和Tris-base溶液                                  5 mL

注意事项

1 亲和柱在不使用时,需放置在于2~8℃保存,并确保在有效期之前使用。

2  柱子的填料应保持湿润,在保存、清洗、上样、洗脱的过程中不能出现填料干燥的情况。

3在操作中,每次需使亲和柱内上一步的液体全部滴净方能进入下一步操作,填料里不应有气泡

4 标准品或样品中都可能含有毒素污染,在实验中应当自始至终穿戴橡胶手套、实验服。

5 实验完后需对所用材料、容器、设备做适当处理。

样品处理

称取试样50g(精确到1mg)于均质器的搅拌杯中,加入5.0g氯化钠和100.0ml的提取液(乙腈:水=60:40)。将搅拌杯装于均质器上,于22000r/min高速搅拌提取3min。提取液经槽纹折叠滤纸过滤于干净的烧杯中。准确移取10.0ml滤液于50ml容量瓶中,加磷酸缓冲液稀释至刻度,混合均匀,经玻璃纤维滤纸过滤,收集滤液,用饱和tris-bsae调节PH=7.0±0.5,待净化。

操作程序

1 自冰箱取出免疫亲和柱,在室温(22~25℃)平衡10 min,将上方塞和下方塞子取出。上方接上已经去掉活塞的注射器。

2 清洗1:将亲和柱固定好,往注射器内依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脱液(A或B)、1 mL PBST、大约5mL PBS;每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速为1滴/2s,滴净后再加入下一个清洗液;最后流出的PBS的 PH应为7±0.5,若尚未达此PH值,适当增加PBS量来清洗。

3上样:准确量取5.0 mL处理后的样品液于注射器,控制流速为1滴/3~5 s,弃去流出液。

4 清洗2: 待样品滴净后,依次加入2 mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。

7 去掉注射器,根据后续检测需要,加入0.2 mL洗脱液A或B,洗脱液自然滴下,用2 mL的离心管接收洗脱液,接洗脱液时,流出第一滴洗脱液不要。

8 将收集到的洗脱液转入仪器分析或采用ELISA/胶体金检测。(用作ELISA/胶体金的收集液用饱和Tris-base调节PH=7.0±0.5)

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