扫一扫，添加微信号
1. 将25mL的氨基-琼脂糖珠转移到50mL洁净的空柱子，用500mL蒸馏水漂洗。
2. 用50mL 50%的冷丙酮洗1次，溶液即将完全进入胶层时，加入50mL 75%的冷丙酮洗1次，溶液即将完全进入胶层时，再加入100mL 100%冷丙酮洗1次。
3. 溶液即将完全进入胶层时，加入含有1mL三乙胺的50mL 丙酮溶液，当溶液（还剩）1/3在胶层上时，反复震荡重悬琼脂糖珠。
4. 用2mL DMF（富马酸二甲脂）溶解150mg NHS活化的碘乙酸，彻底溶解后，1000转离心1分钟，取上清边振荡边逐滴加入3重悬好的琼脂糖珠，盖紧，室温避光反应45分钟。
5. 流干琼脂糖珠液体，用100mL 100%丙酮洗1次，溶液即将完全进入胶层时，用含有0.1N HCL的50mL 75%的冷丙酮洗1次，溶液即将完全进入胶层时，用含有0.1N HCL的50mL 50%的冷丙酮洗1次。
6. 流干琼脂糖珠液体，用500 mL蒸馏水洗1次。
7. 将琼脂糖珠分成5份，5mL/(份)管，排尽水分，可用于5个多肽抗原的偶联。
8. 用1mL含有10mM EDTA的0.1 M Na2CO3溶液溶解5mg抗原多肽，加入“7”准备好的活化琼脂糖珠，用2mL蒸馏水洗多肽瓶，洗液转到活化琼脂糖珠。振荡重悬琼脂糖珠，室温中速摇床上反应60分钟。
9. 流干琼脂糖珠液体，回收液体（含有游离的抗原，可以用于ELISA抑制时用）。
10. 按照新填料的使用步骤进行抗体纯化实验。 11.用ELISA法检测比较抗体纯化前后的效价变化情况，判断填料提纯效果。 注意：第8步要先配现用，尽量避光，防止多肽上的巯基氧化（-SH -S-S- ）
